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11-12
質(zhì)粒pYES2的篩選標(biāo)志為URA,可用SD-URA板板進(jìn)行篩選。BY4742感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pYES2質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率104cfu/μgDNA。操作說明:1、取一支無菌的1.5mlEP管,依次加入預(yù)冷的目的質(zhì)粒1-3µg,CarrierDNA10µl(95-100度5min快速冰浴,重復(fù)一次),100µl冰上融化的AH109感受態(tài)細(xì)胞,PEG/LiAc500µl,輕輕翻轉(zhuǎn)混勻6-8次;2、30℃水浴30min,每10m...
11-6
酵母感受態(tài)細(xì)胞是指通過物理或化學(xué)方法處理,使其在短時間內(nèi)能夠吸收外源DNA分子(如質(zhì)粒或基因片段)的酵母細(xì)胞。這些細(xì)胞通常處于一種“非自然”狀態(tài),能夠克服正常細(xì)胞膜的屏障,將外源DNA成功引入。廣泛應(yīng)用于基因克隆、蛋白表達(dá)、基因編輯、基因敲除等分子生物學(xué)實驗。由于其在細(xì)胞工程中的重要性,如何有效地保存這些感受態(tài)細(xì)胞以保證其長期的穩(wěn)定性和高效性,成為了研究人員關(guān)注的重要問題。保存方法主要分為兩類:冷凍保存法和液氮保存法。這兩種方法在不同的研究環(huán)境下有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。以下是常見的保...
10-25
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究、藥物開發(fā)和生物制品生產(chǎn)中。然而,細(xì)菌和真菌的污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的一大挑戰(zhàn),可能導(dǎo)致實驗結(jié)果失真、細(xì)胞生長受阻,甚至導(dǎo)致實驗的失敗。本文將探討如何有效預(yù)防和處理Hyclone細(xì)胞培養(yǎng)基使用過程中可能出現(xiàn)的細(xì)菌和真菌污染。一、細(xì)胞培養(yǎng)污染的來源1.外部環(huán)境:實驗室空氣中存在的微生物、灰塵、化學(xué)物質(zhì)等都可能成為污染源。2.操作人員:操作人員的手部、衣物和呼吸中可能攜帶細(xì)菌和真菌,直接影響培養(yǎng)基和細(xì)胞的安全性。3.設(shè)備和耗材:細(xì)胞培養(yǎng)器皿、移液器...
10-15
Biospec玻璃珠在生物科學(xué)研究中被廣泛使用,尤其是在樣本處理、細(xì)胞破碎及其他實驗應(yīng)用中。為了確保其性能,正確的儲存方式至關(guān)重要。儲存環(huán)境:1.溫度控制室溫儲存:一般而言,可以在室溫下儲存。避免低溫:盡量避免置于冰箱或冷凍柜內(nèi),因為低溫可能導(dǎo)致物理性質(zhì)變化。2.濕度控制干燥環(huán)境:應(yīng)將儲存在干燥的地方,過高的濕度會導(dǎo)致吸濕和污染。防潮措施:可使用干燥劑(如硅膠包)放在儲存容器內(nèi),以保持環(huán)境干燥。容器選擇:1.儲存容器的材質(zhì)選擇合適的容器:推薦使用干凈的塑料或玻璃容器。避免使用...
10-12
培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)?;九渲茫?.配料配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。2.溶解淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。3.調(diào)PH用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。4.過濾濾紙或棉花進(jìn)行過濾。(有時可以...
9-23
樣本密度分離液是根據(jù)物質(zhì)在液體中的密度差異進(jìn)行分離的一種液體。其基本原理是利用不同組分在液體中的浮力差異,使得密度較低的組分漂浮在液體表面,而密度較高的組分則沉入液體底部。這種方法常用于細(xì)胞分離、微生物培養(yǎng)、粒子分離等應(yīng)用。作為一種有效的分離工具,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、顆粒和其他樣本的分離。使用步驟如下:1、準(zhǔn)備工作在使用之前,需要進(jìn)行充分的準(zhǔn)備工作:.選擇適當(dāng)?shù)姆蛛x液:根據(jù)樣本的性質(zhì)(如細(xì)胞類型、顆粒大小等)選擇合適的密度分離液。.設(shè)備準(zhǔn)備:確保離心機(jī)、試管和其他實驗器材清潔、干...
9-19
胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采血后,通過一系列工藝處理最終獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。血清中沉淀太多,是不是質(zhì)量不好???這些沉淀是什么?這些只不過是血清中的纖維蛋白而已,隨著時間推移而析出產(chǎn)生,本身沒有什么營養(yǎng)價值。那為什么有的血清沉淀多,有的沉淀少?這主要由2個因素:1:保存的時間,血清剛生產(chǎn)后是沒有沉淀的,時間越久,析出的沉淀越多;2:采血后保存運(yùn)輸環(huán)節(jié),血清的每一次凍融,都會析出...
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